PCR試劑盒標準操作流程，一起來了解一下

　　一、試劑制備：

　　1、DNA模板。

　　2.特定引物。

　　3.dNTPMix。

　　4.PCRbuffer。

　　5、熱啟動酶。

　　二、行動

　　1.構建反應系統

　　在0.5ml的離心管內依次加入各組分。

　　采用熱啟動酶進行擴增，使其在常溫下運行，非熱啟動酶在低溫配置反應體系。

　　根據試劑盒說明書設定反應時間和溫度，擴增結束后進行電泳鑒定.

　　三、瓊脂糖核酸電泳

　　把電泳所用的器皿蒸餾水清洗干凈，把梳子固定好。

　　以待分離片段的大小為基礎，制備適當濃度的瓊脂糖凝膠，精確稱取一定數量的瓊脂糖，加入錐形瓶，并加入約30ml電泳緩沖液(TAE)。

　　用微波爐加熱熔化，冷卻至40℃左右，充分混合后倒入電泳槽。

　　在室溫下進行40分鐘的凝固，小心地拔出梳子，將凝膠放入電泳槽準備點樣。

　　向電泳槽內加入電泳緩沖液，漫過膠體表面即可，點樣孔內無氣泡。

　　點樣前準備好，(在八連管中)加入5ul樣品，把1ul的6xLodingbuffer和1ul的染料混合，用搶把混合的樣品緩慢地注入點樣孔，注意不能有串孔。

　　按正負極(紅，黑，黑)接通電源，電壓40-60V，時間30-40min，根據溴酚藍的位置可判斷電泳是否終止。

　　結束電泳，關閉電源，觀察凝膠成像，通過對比確定碎片的大小。

　　以上就是PCR試劑盒標準操作流程！