淺析疫苗核酸試劑盒檢測程序
發布時間:2021-09-13 點擊次數:119次
疫苗核酸試劑盒檢測程序:
1.加樣:每孔各加入標準品或待測樣品100ul,將反應板充分混勻后置37℃120分鐘。 2.洗板:用洗滌液將反應板充分洗滌4-6次,向濾紙上印干。
3.每孔中加入抗體工作液100ul。將反應板充分混勻后置37℃60分鐘。
4.洗板:同
5.每孔加酶標抗體工作液100ul。將反應板置37℃30分鐘。
6.洗板:同。
7.每孔加入底物工作液100ul,置37℃暗處反應15分鐘。
8.每孔加入100ul終止液混勻。
9.30分鐘內用酶標儀在450nm處測吸光值。
備試劑與收集血樣:
1.收集標本:血清、血漿(EDTA、檸檬酸鹽、肝素抗凝)、細胞培養上清液、組織勻漿等盡早檢測,2-8℃保存48小時;更長時間須冷凍(-20℃或-70℃)保存,避免反復凍融。
2.標準品液配制:使用加入0.5ml蒸餾水混勻,配成1200ng/ml的溶液。設標準管8管,管加標本稀釋液900ul,第二至第八管加入標本稀釋液500ul。在管中加入1200ng/ml的標準品溶液100ul混勻后用加樣器吸出500ul,移至第二管。如此反復作對倍稀釋,從第七管中吸出500ul棄去。第八管為空白對照。
3.10×標本稀釋液用蒸餾水作1:10倍稀釋(示例:1ml濃稀釋液+9ml蒸餾水)。
4.洗滌液:用重蒸水1:20稀釋(示例:1ml濃縮洗滌液加入19ml的重蒸水)